L’expression immunohistochimique du CD105 est un marqueur de risque métastatique élevé et de mauvais pronostic dans les cancers du sein

CD105 expression is a marker of high metastatic risk and poor outcome in breast carcinomas :

Correlations between immunohistochemical analysis and long term follow up in a series of 929 patients

Colette CHARPIN-TARANGER*, Jean-Philippe DALES*, Stephane GARCIA*, Lucile ANDRAC-MEYER*, Olivier RAMUZ*, S. CARPENTIER-MEUNIER*, Pascal BONNIER **

INTRODUCTION

L’angiogenèse est un processus complexe permettant la croissance tumorale et le développement des métastases. En effet, l’angiogenèse concerne la migration et la prolifération des cellules endothéliales, la différenciation des microvaisseaux et leurs anastomoses, ainsi que le remodelage de la matrice extracellulaire [1-3]. La quantification de l’angiogenèse dans les tumeurs solides est un marqueur pronostique [4-5].

Dans les cancers invasifs du sein, l’importance de la néovascularisation a été décrite comme un indicateur pronostique [6]. De plus, la microvascularisation tumorale constitue une cible potentielle pour les traitements anti-angiogéniques [3].

La densité du stroma tumoral en microvaisseaux a été étudiée, en marquant ceux-ci avec des anticorps considérés comme « pan-endothéliaux », tels que le CD34, le CD31 ou le facteur de Von Willebrand [3, 7]. L’anticorps monoclonal anti CD105 a la particularité « in vitro » de se fixer préférentiellement sur les cellules endothéliales activées [8-11]. De plus, le CD105 est fortement exprimé dans les cellules endothé- liales des vaisseaux tumoraux alors qu’il ne l’est pas dans la plupart des tissus normaux [10, 11]. De récentes études ont montré que le traitement par immunotoxine anti CD105 inhibe la croissance tumorale dans les xénogreffes de cancer du sein chez les souris immunodéficientes [8,12]. Etant donné que l’expression du CD105 dans le cancer du sein reflète la néoangiogenèse et l’activation des cellules endothéliales, l’immunodétection du CD105 peut être considérée non seulement comme un marqueur pronostique [13], mais aussi comme une méthode permettant d’identifier les patientes potentiellement candidates à un traitement antiangiogénique spécifique avec des anticorps anti CD105 conjugués [12].

Dans la présente étude, nous avons évalué l’expression immunohistochimique du CD105 sur coupe de tissu congelé dans une série de 929 patientes porteuses de cancer du sein. Nous avons corrélé les résultats avec l’évolution à long terme (médiane 11,3 ans). Nos résultats montrent que l’expression immunohistochimique du CD105 est un marqueur de risque métastatique élevé et de mauvais pronostic dans les cancers du sein.

MATÉRIELS ET MÉTHODES

Matériel

Neuf cent vingt-neuf malades âgées de 25 à 81 ans (moyen = 56,1 ans fi 13, 3) porteuses du cancer du sein ont été opérées de 1986 à 1994. Aucune patiente n’a été traitée par chimiothérapie ou hormonothérapie avant le traitement chirurgical. Les patientes ont été traitées par tumorectomie ou zonectomie, avec limites d’exérèse saines, ou par mastectomie et évidement ganglionnaire axillaire, dans le même département de Gynécologie Oncologique de l’Hôpital de la Conception (même équipe chirurgicale, PB). Tous les prélèvements ont été examinés dans le même département d’Anatomie et Cytologie Pathologiques par les mêmes pathologistes expérimentés en pathologie mammaire depuis plus de 10 ans.

Les patientes ont été suivies de 6 à 15 ans (médiane de suivi, 11,3 ans). Les données archivées sur fichier informatique montrent que 340 malades (36,6 %) avaient récidivé, parmi lesquelles 228 étaient aussi décédées (médiane de survie, 82 mois) et 589 patientes (63,4 %) ne présentaient pas de récidive. La durée de la survie globale a été calculée du traitement chirurgical jusqu’à la date du décès. Les durées de survie
sans métastase et sans récidive ont été calculées à partir du traitement chirurgical jusqu’à la date de la première métastase ou première récidive.

La moyenne de la taille tumorale était de 20,7 mm (fi 13,8) et 23 % des tumeurs étaient > 7 mm et ’’δ 10 mm, 41 % > 10 mm et ’’δ 20 mm, 22 % > 20 mm et ’’δ 30 mm, et 14 % > 30 mm.

L’étude histologique des pièces opératoires a été effectuée sur coupe de tissu fixé et après inclusion en paraffine et colorées à l’Hématoxyline, Phloxyne, Safran.

Les tumeurs étaient en majorité des adénocarcinomes canalaires (n = 632, 68 %).

Les autres types histologiques correspondaient à des carcinomes lobulaires (n = 167, 18 %), et les autres tumeurs (n = 130, 14 %) correspondaient à des carcinomes de type histologique autre (mucineux, papillaires, apocrines, des tumeurs mixtes ou des carcinomes médullaires).

Les tumeurs initialement gradées selon la méthode de SBR [14] ont été reévaluées et regradées selon les recommandations européennes [15]. Vint quatre % des tumeurs étaient de grade 1 (n = 223), 51 % de grade 2 (n = 474) et 25 % de grade 3 (n = 232).

Le nombre de ganglions moyens retrouvés dans les évidements ganglionnaires axillaires est de 14,7 ganglions (fi 4,3). Plus de la moitié des patientes, 506 / 929 (54,5 %) étaient dépourvues de métastase ganglionnaire.

Techniques immunohistochimiques

Lors de l’examen peropératoire, des fragments de tumeur visible et palpable sont prélevés par les pathologistes et rapidement congelés. Les fragments tumoraux, variant avec la taille de la tumeur, mesurent dans les conditions optimales 5 mm de long × 4 mm de large × 3 mm d’épaisseur. Les fragments tissulaires sont prélevés dans les zones tumorales denses macroscopiquement dépourvues de zone adipeuse et de nécrose. Les fragments sont rapidement congelés dans l’azote liquide et conservés à —80° C dans la tumorothèque du Service d’Anatomie Pathologique. Les immunodétections ont été effectuées sur les résidus tumoraux stockés à —80° C obtenus après les tests diagnostiques (immunodétection des sites antigéniques des récepteurs, immunodétection du Cerb B2) et coupés à une épaisseur optimale grace à un cryostat automatisé (cryostat Leica CM 3050, Rueil Malmaison, France).

La technique d’immunodétection à partir d’une banque de tissu a été choisie, en premier lieu, car elle constitue la technique optimale où les antigènes sont mieux préservés et qu’elle permet d’évaluer dans les meilleures conditions la signification pronostique d’un marqueur. En fonction des résultats, la technique en paraffine peut être développée, des anticorps utilisables sur tissu fixé étant commercialisés.

Les techniques d’immunoperoxydase ont été effectuées grace à l’anticorps monoclonal (clone 8 E11) [16] souris (dilué 1 : 20) anti CD105 humain (Novocastra, Tebu Le Perray en Yvelynes, 78610, France). Les tests immunohistochimiques standardisés ont été effectués sur l’automate Ventana Gene II et Kits Ventana.

Le compte des microvaisseaux a été effectué dans les zones les plus richement vascularisées (définies dans la littérature comme « hot spots ») dans quatre champs (0,424 mm2) avec un objectif X 20 (champs de 1 060 µm de diamètre) avec un microscope Zeiss Axioplan. La moyenne du nombre de vaisseaux comptés dans les quatre champs différents a été retenue comme la valeur finale du nombre de vaisseaux inclus dans l’étude statistique. La surface marquée par le CD105 a été évaluée en pourcentage de la surface tumorale marquée par rapport à la surface tumorale non marquée mise en évidence par la contre-coloration (objectif X20).

Etude statistique

L’étude des corrélations et les courbes de survie (Kaplan-Meier) ont été effectuées par le log rank test (Mantel Cox). La validation des seuils de significativité a été effectuée selon la méthode de Altman et Coll. [17]. Le principe de la méthode d’Altman [17] consiste à vérifier la validité de la signification des corrélations pour des valeurs (de nombre de vaisseaux ou de surface marquée) en dessus de la valeur déterminée comme le seuil (12 % de surface et le nombre de 15 vaisseaux) avec des valeurs du « p » restant inférieur à 0,05.

Tous les tests statistiques avec étude de variables uniques ou multiples ont été effectués avec le logiciel NCSS 2000 (Kaysville, Utah).

RÉSULTATS

Distribution du CD105

La positivité avec l’anti CD105 est située dans les cellules endothéliales avec une topographie membranaire et sous-membranaire, et à un moindre degré, dans le cytoplasme des cellules endothéliales des vaisseaux de petite taille (Fig. 1, 2).

L’immunomarquage présentait une distribution régulière dans les petits vaisseaux, donnant un aspect linéaire avec une bonne séparation des structures positives, permettant leur comptage. La distribution du nombre de vaisseaux évaluée dans les 929 tumeurs est illustrée dans la Figure 3 (nombre moyen = 13,9 ; médiane = 12) et la distribution des surfaces marquées en pourcentage du CD105 est illustrée dans la Figure 4 (moyenne = 10,75 % fi 3,7 ; médiane = 11 %).

Courbes de survie (Kaplan Meier / Log Rank)

La surface tumorale CD105 positive (seuil © 12 %) est corrélée (p = 0,03) avec la survie globale, Figure 5. Les tumeurs ayant des surfaces CD105 positives les plus importantes sont associées avec une moins bonne survie que les tumeurs n’exprimant que de faibles surfaces CD105 positives. La validation du seuil optimal (12 %)

FIG. 1. — Expression immunohistochimique par technique d’immunoperoxydase (Ventana Gene II) sur coupes de tissu congelé (cryostat Leica 3050) avec anticorps monoclonal (8 E 11), carcinome canalaire infiltrant (X 130) : l’immunomarquage souligne par un fin liseré la trame de la microvascularisation dans le stroma tumoral.

FIG. 2. — Même cas et même technique que la Figure 1 à plus fort grossissement (X 480).

FIG. 3. — Distribution du nombre de vaisseaux marqués par anticorps CD105 par technique d’immunoperoxydase sur coupes de tissu congelé dans la série de 929 malades porteuses de cancer du sein.

FIG. 4. — Distribution des pourcentages de surface CD105 positive sur coupes de tissu congelé dans la série étudiée de 929 malades porteuses de cancer du sein.

est illustrée dans la Figure 6, à partir de la courbe des « p » [17]. Cependant, lorsque les malades sont séparées en deux groupes, groupe ganglion axillaire positif (n = 423/929) versus groupe ganglion axillaire négatif (n = 506/929), l’immunoexpression du CD105 n’a pas de valeur pronostique significative.

Lorsque la totalité du groupe est considérée (n = 929), les surfaces CD105 positives supérieures à 12 % sont corrélées à l’apparition de métastases (p = 0,004). Mais cette corrélation n’est plus observée dans le sous-groupe de malades, ganglion axillaire négatif.

Le nombre de vaisseaux (seuil n = 15) est aussi corrélé à la survie globale (p = 0,001),

Figure 7.

En effet, les tumeurs dont le compte de microvaisseaux CD105 positifs est le plus élevé, sont associées à un pronostic plus mauvais que les tumeurs qui ont un nombre plus faible de vaisseaux CD105 positifs. La validation de ce seuil (n = 15) est illustrée dans la Figure 6.

Lorsque les patientes sont divisées en sous-groupes ganglions positifs, versus ganglions négatifs, le nombre de microvaisseaux CD105 positifs garde une signification pronostique chez les patientes qui sont ganglions négatifs (p = 0,035), Figure 8.

Le nombre de vaisseaux CD105 > 15 est aussi corrélé avec un risque élevé de métastases (p = 0,0002) Figure 9, ainsi que le risque de rechute (métastase et récidive locale) (p = 0,0006), Figure 10. La même corrélation est observée dans le sousgroupe de malades dépourvues de métastase ganglionnaire (p = 0,001), Figures 11 et 12.

Etude multifactorielle (modèle de Cox)

L’étude multifactorielle montre qu’un nombre de vaisseaux CD105 positifs (mais non le pourcentage de surface CD105 positif) est un indicateur pronostique indé- pendant des autres facteurs pronostiques : taille tumorale, grade histopronostique et type histologique, statut ganglionnaire (Tableau 1).

DISCUSSION

Dans de multiples types de tumeurs, y compris les cancers du sein, des études récentes ont montré qu’une forte angiogenèse était corrélée avec des risques élevés de métastases [1, 3, 5, 13, 18-20].

Les microvaisseaux intratumoraux peuvent être identifiés par techniques immunohistochimiques avec marquage des cellules endothéliales grace à des anticorps reconnus comme des marqueurs « pan-endothéliaux » tels que le CD34, CD31 ou facteur de Von Willebrand. Cependant, les cellules endothéliales présentes dans les tumeurs et dans les tissus normaux sont hétérogènes en terme de réactivité avec ces

FIG. 5. — Courbe de survie (Kaplan Meier) montrant des risques significativement plus élevés de décès (p = 0,03) dans les tumeurs présentant une immunoexpression du CD105 évaluée en surface (seuil = 12 %) plus élevée.

FIG. 6. — Courbe des p. (Log rank test ) montrant la validité de seuil optimal de surface et du nombre de vaisseaux, marquée par l’anti CD105, pour la survie globale, selon la méthode de Altman [17].

FIG. 7. — Courbe (Kaplan Meier) montrant une survie globale (sur la totalité de la série étudiée n = 929) moins bonne chez les malades porteuses de cancer du sein dont les tumeurs présentent une néoangiogenèse importante avec un nombre de vaisseaux CD105 positifs > 15 (p = 0,001).

FIG. 8. — Courbe (Kaplan Meier) montrant une survie globale (sur la totalité de la série étudiée n = 929) moins bonne chez les malades porteuses de cancer du sein dont les tumeurs présentent une néoangiogenèse importante avec un nombre de vaisseaux CD105 positifs > 15 (sous-groupe des patientes ganglions axillaires négatifs, n = 506) p. = 0,035 (Kaplan Meier).

FIG. 9. — Les malades présentant un nombre de vaisseaux CD105 > 15 ont des risques de métastase plus élevés (p = 0,0002), si ce risque est évalué sur la totalité du groupe testé (n = 929) (Kaplan Meier).

FIG. 10. — Les patientes ayant un nombre de vaisseaux CD105 positifs > 15 ont un risque plus élevé de récidive (p = 0,0006) si la totalité de la série est considérée (n = 929) (Kaplan Meier).

Fig. 11. — Les malades dépourvues de métastase ganglionnaire axillaire ont aussi des risques de métastase plus élevés lorsque le nombre de vaisseaux CD105 positifs est > 15 (p = 0,001) (Kaplan Meier).

FIG. 12. — Courbe des p. (Log rank test) montrant le seuil optimal du nombre de vaisseaux CD105 positifs, selon la méthode de Altman [17].

TABLEAU 1. — Etude multifactorielle (modèle de Cox) : Survie globale dans la population totale (n = 929) et dans le sous-groupe (N-) ganglion axillaire négatif (n = 506).

Variables Niveau de probabilité CD 105 surface positive (%), toutes les malades 0.072395 Grade histopronostique 0.012920 Type histologique 0.795489 Taille tumorale 0.992109 Nombre de vaisseaux positifs, toutes les malades 0.005412 Grade histopronostique 0.016631 Type histologique 0.928095 Taille tumorale 0.999623 CD 105, nombre de vaisseaux, malades N0.002636 Grade histopronostique 0.011671 Type histologique 0.746238 Taille tumorale 0.722453 différents marqueurs vasculaires, qui ne marquent pas tous les vaisseaux de la même façon [5-7].

A cet égard, le facteur Von Willebrand qui est utilisé en pathologie comme marqueur « pan-endothélial » pour identifier les tumeurs d’origine vasculaire, en général, réagit fortement avec les cellules endothéliales des vaisseaux de grand calibre, avec au contraire une faible expression ou une absence d’expression dans les vaisseaux de petit calibre ou microvaisseaux, à la fois dans les tissus normaux et dans les tumeurs [21].

De plus, les anticorps anti CD34 ou CD31 ne sont pas entièrement spécifiques des cellules endothéliales [1, 6, 7, 21]. Ceci explique pourquoi l’expression immunohistochimique du CD34 dans les tumeurs n’est pas significativement corrélée à la survie des malades [13] ou pourquoi l’expression immunohistochimique du CD31 n’a qu’une signification pronostique limitée chez les patientes ganglions négatives [22].

Pour toutes ces raisons, les anticorps anti pan-endothéliaux ne constituent pas les marqueurs tissulaires les plus pertinents pour visualiser et évaluer la vascularisation tumorale.

En revanche, l’utilisation d’anticorps qui réagissent spécifiquement avec les cellules endothéliales des tissus ayant une néoangiogenèse majeure et qui ne réagissent pas avec les tissus normaux, ont l’avantage de ne pas marquer les vaisseaux sanguins normaux qui peuvent être englobés dans le stroma tumoral. Ces derniers en effet ne sont pas marqués, réduisant la probabilité d’une surévaluation de l’angiogenèse tumorale, comme c’est le cas par le marquage avec les anticorps pan-endothéliaux qui marquent à la fois les vaisseaux résultant de la néoangiogenèse tumorale et les vaisseaux normaux.

TABLEAU 2. — Etude multifactorielle (Cox modèle) : Métastase et récidive dans la population totale (n = 929) et dans la population (N-) dépourvue de métastase ganglionnaire axillaire.

Métastases Niveau de probabilité CD 105 surface positive (%), toutes les patientes . . . . . . . .

0.000823

Grade histopronostique. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

0.001050 Type histologique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

0.499000 Taille tumorale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

0.891523 Nombre de vaisseaux positifs, toutes les patientes . . . . . . .

0.001242

Grade histopronostique. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

0.009448 Type histologique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

0.6688691 Taille tumorale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

0.829392 CD 105, nombre de vaisseaux, patientes N- . . . . . . . . . . . .

0.003796

Grade histopronostique. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

0.006605 Type histologique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

0.992503 Taille tumorale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

0.582477 L’Endogline (CD105) est une glycoprotéine de membrane surexprimée dans les cellules endothéliales activées, ayant une forte prolifération en culture. Le CD105 est le récepteur du TGF—β (« Transforming Growth Factor ») [10, 11]. Les études immunohistochimiques préliminaires ayant utilisé les anticorps anti CD105 ont montré que les anticorps anti CD105 réagissent avec les néovaisseaux de tissu néoplasique [8-11, 23].

Une seule étude jusqu’à présent, montrant la signification pronostique du CD105, a été publiée [13]. Cette étude néanmoins inclut un nombre relativement faible de patientes (n = 106) avec un suivi court de l’évolution clinique des malades. Dans notre étude, nous avons inclus un nombre de malades nettement plus important (n = 929) dont nous avons suivi l’évolution clinique sur une durée de plus de dix ans.

Globalement, nos résultats montrent que dans ces conditions, l’expression immunohistochimique intratumorale du CD105, lorsqu’elle est élevée, est corrélée avec un mauvais pronostic, même et surtout, chez les malades dépourvues de métastase ganglionnaire axillaire. De plus, nos résultats montrent que cette signification pronostique, dans ce sous-groupe de malades, dépourvues de métastases ganglionnaires, dont 30 % seulement vont récidiver, l’expression immunohistochimique du CD105 dans les microvaisseaux est un marqueur pronostique indépendant en étude multifactorielle. Nos résultats non seulement confirment l’étude préliminaire récemment publiée par Kumar et coll . [13], mais mettent en évidence l’intérêt pratique de l’immunodétection du CD105 intratumoral, puisque celle-ci permet d’identifier les malades dépourvues de métastase ganglionnaire mais qui ont un risque de métastase plus élevé, et de ce fait, des survies plus courtes. A cet égard, le compte des microvaisseaux CD105 positifs dans les cancers du sein est un paramètre
prédictif plus sensible que l’évaluation de la surface en pourcentage CD105 positif dans les tumeurs.

Puisque l’angiogenèse est essentielle pour le développement tumoral et l’apparition des métastases. La microvascularisation tumorale constitue une cible appropriée pour des thérapeutiques spécifiques [3]. Bien que les réponses au traitement de première génération dans les premiers essais thérapeutiques ne soient pas révélées significatives sans régression tumorale importante, les études expérimentales effectuées sur des xénogreffes ont montré une régression très significative des tumeurs avec traitement anti-angiogénique [voir revue de la littérature dans 3]. En particulier, dans les tumeurs solides induites par inoculation chez les souris immunodéficientes de cellules cancéreuses humaines MCF-7, une régression complète et de longue durée des tumeurs a été observée après administration d’anticorps monoclonaux CD105 conjugués [12, 20]. Ces résultats sont très en faveur d’une potentielle utilité clinique de ces conjugués, notamment après radiothérapie [24]. Le but de de la thérapie antigiogénique spécifique est de cibler la néoangiogenèse tumorale en évitant les effets secondaires liés à la destruction des vaisseaux normaux dans les tissus normaux. C’est pourquoi, il semble très approprié de pouvoir cibler un antigène présent dans les cellules endothéliales activées, associé à une prolifération vasculaire responsable de la néoangiogenèse dans les tumeurs qui induirait le minimum d’effets secondaires. A cet égard, l’utilisation de conjugués associés à des anticorps monoclonaux anti CD105 semble avoir un avenir très prometteur. Et, afin d’éviter des thérapeutiques coûteuses et inutiles, un test diagnostique simple tel que l’immunodétection du CD105 intratumoral par technique immunohistochimique semble aussi une méthode prometteuse, au même titre que la détection de l’antigène Cerb B2 surexprimé dans les tumeurs, (lié à l’amplification du gène cerb B2 ) actuellement utilisé pour les indications thérapeutiques dans les protocoles, incluant le Trastuzumab.

En conclusion, notre étude montre que l’expression immunohistochimique du CD105 dans les cancers du sein est un marqueur prédictif de mauvais pronostic particulièrement intéressant chez les patientes dépourvues de métastase ganglionnaire axillaire au moment du traitement chirurgical premier. De plus, il est permis de penser qu’une expression immunohistochimique élevée du CD105 dans les tumeurs peut être le facteur déterminant pour une thérapeutique antiangiogénique spécifique par anticorps monoclonaux anti CD105 conjugués, à la fois dans la population totale des cancers du sein, mais aussi dans un petit sous-groupe à haut risque des patientes, bien que dépourvues de métastase ganglionnaire.

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DISCUSSION

M. Christian NEZELOF

Que demande la création et l’entretien d’une tumorothèque d’une telle importance, du point du vue financier, et en charge de personnel ? Le CD105 est un marqueur d’activation endothéliale. Il est sans doute le marqueur d’autres cellules activées. Si la réaction est positive pour d’autres cellules, cette positivité peut-elle être prise en compte par l’évaluation automatique de la machine ?

Cette tumorothèque a pu être constituée par l’acquisition de matériels grâce à des crédits de recherche contractuels. Le coût d’un congélateur à —80° C équipé en sécurité, de grand volume (360 litres) est actuellement de 13.000 k. Notre tumorothèque comporte quatre congélateurs afin de pouvoir transférer les prélèvements en cas de panne de l’un d’entre eux. L’équipement nécessaire comporte, de plus, des climatisations de forte puissance.

Sachant qu’un congélateur et une climatisation bien entretenus ont une durée moyenne de six à sept ans, le coût annuel moyen incluant les recharges de bouteilles de CO2, les abonnements téléphoniques pour les alarmes, les systèmes de classement dans les congé- lateurs, les containers de transport peut être évalué à un total de 10.000 k annuels (amortissement des congélateurs inclus).Le coût en personnel est difficile à chiffrer mais nécessite la disponibilité et surtout la compétence des pathologistes. Le CD105 peut intéresser d’autres éléments cellulaires que les cellules endothéliales activées. Sur coupe à congélation et dilution utilisée, ceci est cependant très rare, comme vous avez pu l’observer sur les illustrations d’immunomarquages projetées. Il est clair que néanmoins ce problème peut gêner à la quantification des structures vasculaires et introduire des biais d’analyse. C’est pourquoi, nous nous sommes concentrés, comme conseillé et appliqué largement dans la littérature, à utiliser plus le compte de vaisseaux que les surfaces marquées dans les zones les plus vascularisées (‘‘ hot-spots ’’). Les marquages ponctuels autres que vasculaires ne sont alors pas pris en compte. Même par une évaluation automatisée où les paramètres de densitométrie sont couplés aux paramètres de forme, ces marquages non vasculaires ne sont pas pris en compte.

M. Claude DREUX

Avez-vous différencié dans la population étudiée les patientes ayant reçu un THS postménopausique à court ou long terme ? Le marqueur CD105 pourrait-il permettre de différencier les cancers ‘‘ post-THS ’’ généralement de meilleur pronostic, des cancers du sein courants ? ’’

Dans une étude récente publiée avec notre équipe clinique (Pascal Bonnier), nous avons montré que dans notre matériel, nous avions des chiffres identiques à ceux de la littérature concernant l’incidence des cancers du sein sous THS. Ceux-ci sont en fait peu fréquents. Nos études ont montré que ces cancers sont de bon pronostic car ils sont dépistés tôt (surveillance des malades sous THS), donc le plus souvent petits, de bas grade et N-. Dans ces conditions, ils devraient répondre aux sous-groupes des tumeurs qui comportent peu de vaisseaux et qui sont CD105 faiblement positifs et de bon pronostic.

Mme Denise-Anne MONERET-VAUTRIN

Le marqueur CD105 est-il un marqueur d’angiogénèse tumorale ou pourrait-il être appliqué à des affections comportant une angiogénèse non tumorale ?

Le CD105 n’est pas un marqueur d’angiogénèse tumorale mais un marqueur d’activation des cellules endothéliales pouvant être identifié dans des processus autres tels que la régénération ou la cicatrisation. Néanmoins, dans le cadre des tumeurs, ce marqueur a bien été identifié au niveau des cellules endothéliales du stroma tumoral, et non dans les vaisseaux normaux. Ceci fait toute sa valeur car il permet de différencier la néoangiogé- nèse de la vascularisation simple.

M. Pierre GODEAU

Vous avez affirmé que ce marqueur n’était pas redondant avec les autres marqueurs tumoraux. Dans le suivi de vos patientes, y avait-il une différence pronostique en présence ou en absence de récepteurs hormonaux ?

Dans notre matériel, comme les données de la littérature le montrent, les données pronostiques corrèlent la présence des récepteurs, notamment des récepteurs à la progestérone. En fait, les récepteurs hormonaux ne sont que des marqueurs de différenciation épithéliaux (fonction cellulaire), parfaitement corrélés au grade histopronostique et au statut ganglionnaire. Néanmoins, il s’agit de marqueurs pronostiques peu sensibles puisque la plupart des petites tumeurs de grade 1 ou N- sont récepteurs positifs (> 90 %), ne permettant pas de différencier les sous-groupes N- de plus mauvais pronostic.

Bull. Acad. Natle Méd., 2003, 187, no 6, 1129-1146, séance du 1er juillet 2003